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獸用B超機與奶牛早期性別鑒定方法之比較
來源:未知|發布時間:2017-01-23 09:36
獸用B超機在奶牛胚胎學超聲影像及***應用
獸用B超機可被用來估計胎齡,監測胎兒生長及診斷妊娠失調等。胎兒各部分如眼球、胃、肋骨等都可被探測到。為確定各器官發育情況應調整探頭位置以獲得***大掃描斷層。還可根據胎齡計算出各組織生長相關系數。總之,可根據胎兒各器官大小判定胎齡和生長發育程度,同時建立奶牛胎兒變化的超聲影像系統,并據此準確預報產期以利于生產管理。一般在生產中,用獸用B超機直腸探測奶牛的妊娠胎數和鑒定性別是同時進行的,這個適宜的時間范圍是妊娠后的 55~75 天,通常在 67 天進行測定,妊娠時間太長或太短都不適宜做***。
***主要是通過定位與尾部和臍帶有關的生殖結節來判斷,具體為:臍帶成像為一亮點,若臍帶附近即胎兒腹部有另一亮點,而尾根部沒有二個或三個亮點,可判為公的;若腹部只有臍帶一個亮點,而尾根部有二個或三個亮點,即可判為母的。
 在做完一個胎兒的鑒定后,工作還沒有結束,應該按上述方法探測是否還有其他胎兒存在并鑒定性別。大量的生產實踐證明,除了極少數特例外,如母牛妊娠胎兒位置不好,較深,奶牛努責太厲害,以致手握探頭不能成像清楚導致***失敗,其他的情況,只要按正確方法仔細操作,都能探測出來。具體使用方法可以參考牛用B超機操作方面存在的問題及解決方法
奶牛早期***方法
(一) 細胞遺傳學法
通過核型分析來完成胚胎***,***早用于兔、羊、牛。先取少量的胚胎細胞,在含有秋水仙素的培養液中培養,由于秋水仙素的阻抑作用使細胞的有絲分裂停留在中期,在滲透壓的作用下使細胞膨脹,細胞壁破裂,染色體被釋放,然后經固定和姬姆薩染色后在顯微鏡下觀察。由于有絲分裂被阻滯在中期,故染色體縮短,形狀規則,并有特異的帶型,通過核型分析,確定其性染色體類型屬XX還是XY型,這種方法鑒定胚胎性別的準確率幾乎是100%,但操作過程比較煩瑣。
(二) X染色體連接酶活力測定法
哺乳動物性染色體的類型,雌性為XX而雄性為XY型,為了維持性別之間的基因平衡,在胚胎發育的早期,雌性個體每個細胞中的一條x染色體是失活的,盡管這條x染色體失活的確切時間尚不知道,但可以肯定的是在這條染色體失活前有一段時間,兩條X染色體均有活性,并進行轉錄,這表現在胚胎發育的早期,雌性胚胎x染色體連鎖酶的活性是雄性胚胎的兩倍。依據這一事實,Williams和Monk等檢測了小鼠桑椹胚至囊胚期這段時間X染色體連鎖酶的活性,即葡萄糖-6—磷酸脫氫酶的活性,以預測胚胎的性別,移植后分娩結果表明雌性、雄性胚胎的準確率分別為72%、57%。這種方法鑒定胚胎的準確率較低,主要原因是不知道X染色體失活的確切時間
(三) H—Y抗原法
目前利用H-y抗原進行胚胎***的方法有兩種,即細胞毒性分析法和間接免疫熒光法。 
1.細胞毒性分析法
將胚胎培養在含有H-Y抗血清與補體(豚鼠血清)的培養液中進行培養,有H-Y抗原的胚胎表現出一定的細胞溶解,此類胚胎被判為雄性胚胎。能夠繼續發育即H-Y陰性的胚胎移植后所生仔鼠有86%為雌性。該方法以破壞雄性胚胎為代價,故現已很少采用。
2.間接免疫熒光法
先將8細胞至囊胚期胚胎與H-y抗體反應30min,再與用異硫氰酸鹽熒光素(FITC)標記的免疫球蛋白M(IgM)抗體反應。然后在熒光顯微鏡下檢查胚胎是否帶有熒光素,若有熒光素則被判定為雄性。此法主要優點是不損害胚胎,準確率比較高,豬、綿羊、牛雌性鑒定準確率分別可達81%、85%和89%。但該方法需要熒光顯微鏡和豐富的經驗。 
(四) Y染色體特異性DNA探針法
應用這一方法必須經過復雜的技術過程制備特異性的、經同位素標記的Y染色體特異序列的探針,用這一探針與從胚胎細胞中提取出的少量DNA雜交,雜交結果呈陽性的說明有Y染色體,可判為雄性。該方法準確率達90%。
    九十年代初,英國學者發現了存在于Y染色體短臂上的、決定雄性的DNA片段,定名為SRY,即性別決定區(基因)。這一發現被認為是九十年代以來生物科學的重大成就之一,為進一步開展性別控制研究奠定了基礎。將其與聚合酶鏈反應(PCR)擴增技術相結合,應用于胚胎***,準確率可達100%;國內研究者已成功地用PCR技術直接擴增牛胚胎的SRY特異DNA序列,能夠準確地鑒定牛胚胎的性別。
隨著科學技術的進步快捷有效的方法是未來的發展趨勢,獸用B超機在奶牛***方法有明顯的優勢,因此也是未來奶牛業主要檢測工具.
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